Please use this identifier to cite or link to this item: http://ktisis.cut.ac.cy/handle/10488/10872
Title: Study of maillard reactions with coupled chromatographic and spectroscopic techniques
Authors: Ioannou, Aristodimos 
Keywords: Model;Maillard reactions;Asparagine;Fructose;High temperature
Advisor: Varotsis, Constantinos
Issue Date: Sep-2017
Publisher: Τμήμα Επιστήμης και Τεχνολογίας Περιβάλλοντος, Σχολή Γεωτεχνικών Επιστημών και Διαχείρισης Περιβάλλοντος, Τεχνολογικό Πανεπιστήμιο Κύπρου
Abstract: The present research work was aimed to study model Maillard reactions by a combination of analytical techniques such as HPLC, UV-vis and ATR-FTIR spectroscopies. The Maillard reaction involves a complex network of chemical reactions that occur in food after processing at high temperatures. A further purpose of this study was to develop simple spectroscopic methods of application of the spectroscopic properties of the food constituents. The reaction of asparagine and fructose at high temperature was studied by the coupling technique of HPLC-ATR-FTIR. The coupling of high performance liquid chromatography (HPLC) with FTIR detection provides a further capability for confirming chemical system changes in a new experimental layout. Furthermore, the formation of the Amadori products was identified by employing a combined analytical technique of Solid Phase Extraction (SPE) and Attenuated Total Reflection-Fourier Transform Infrared Spectroscopy (ATR-FTIR). The isolation of reaction products of asparagine with reducing sugars at alkaline pH and high temperature was probed by a combination of high performance liquid chromatography (HPLC) coupled with a Fraction Collector. The reaction products were analyzed by UV-vis and Fourier transform infrared (FTIR) spectrophotometry. The UV- vis and FTIR spectra of the isolated Maillard reaction products showed structure sensitive changes as depicted by deamination events and formation of asparagine saccharide conjugates. Evidence for Cu (II) metal ion complexation with the Maillard reaction products is supported by UV-Vis and FTIR spectroscopy. The same model system was utilized to investigate the interaction of Maillard reaction products formed by the reactions of saccharide-derived compounds creating intermediates with proteins, more specifically with hemoglobin and myoglobin. The spectral events upon addition of discrete MRPs to hemoglobin and myoglobin were monitored. This led to the formation of a modified protein adduct known as a hemichrome. Additionally, fluorescence spectroscopy was employed as a complementary technique to study the reaction of hemoglobin with MRPs from an asparagine-sugar model system. The modification of hemoglobin by MRPs was illustrated through tryptophan- specific changes in the fluorescent spectra.
Description: Η παρούσα ερευνητική εργασία έχει ως στόχο τη μελέτη μοντέλων αντιδράσεων Maillard με συνδυασμό αναλυτικών τεχνικών, όπως η χρωματογραφία HPLC και η φασματοσκοπία UV-vis και ATR-FTIR. Η αντίδραση Maillard περιλαμβάνει ένα σύνθετο δίκτυο χημικών αντιδράσεων που εμφανίζονται σε τρόφιμα μετά από επεξεργασία σε υψηλές θερμοκρασίες. Ένας περαιτέρω σκοπός αυτής της μελέτης είναι η ανάπτυξη απλών φασματοσκοπικών μεθόδων εφαρμογής των φασματοσκοπικών ιδιοτήτων των συστατικών των τροφίμων. Η αντίδραση της ασπαραγίνης και της φρουκτόζης σε υψηλή θερμοκρασία μελετήθηκε με την τεχνική σύζευξης της HPLC-ATR-FTIR. Η σύζευξη της υγρής χρωματογραφίας υψηλής απόδοσης (HPLC), με την ανίχνευση FTIR, παρέχει μια περαιτέρω δυνατότητα επιβεβαίωσης των αλλαγών του χημικού συστήματος σε μια νέα πειραματική διάταξη. Επιπλέον, ο σχηματισμός των προϊόντων Amadori ταυτοποιήθηκε χρησιμοποιώντας μια συνδυασμένη αναλυτική τεχνική της Εκχύλισης Στερεάς Φάσης (SPE) και της φασματοσκοπίας υπέρυθρου εξασθενημένης ολικής ανάκλασης με μετασχηματισμό Fourier (ATR-FTIR). Η απομόνωση των προϊόντων αντίδρασης της ασπαραγίνης με αναγωγικά σάκχαρα σε αλκαλικό pH και υψηλή θερμοκρασία ανιχνεύθηκε με συνδυασμό υγρής χρωματογραφίας υψηλής απόδοσης (HPLC), σε συνδυασμό με έναν συλλέκτη κλασμάτων. Τα προϊόντα αντίδρασης αναλύθηκαν με φασματοφωτομετρία ορατού-υπεριώδους (UV-vis) και υπέρυθρης ακτινοβολίας με μετασχηματισμό Fourier (FTIR). Τα φάσματα ορατού-υπεριώδους (UV-vis) και FTIR των απομονωθέντων προϊόντων αντίδρασης Maillard έδειξαν αλλαγές ευαίσθητες στη δομή όπως συσχετίζονται με απαμίνωση και σχηματισμό συζυγών ασπαραγίνης-σακχαρίτη. Η απόδειξη για τη σύμπλεξη ιόντων μετάλλων χαλκού Cu(II) με τα προϊόντα αντίδρασης Maillard υποστηρίζεται από τη φασματοσκοπία UV-vis και FTIR. Το ίδιο μοντέλο συστήματος χρησιμοποιήθηκε για να διερευνηθεί η αλληλεπίδραση των προϊόντων αντίδρασης Maillard που σχηματίστηκαν από τις αντιδράσεις των προερχόμενων από σακχαρίτη ενώσεων, δημιουργώντας ενδιάμεσα με πρωτεΐνες, πιο συγκεκριμένα με αιμοσφαιρίνη και μυοσφαιρίνη. Παρατηρήθηκαν τα φασματικά γεγονότα κατά την προσθήκη διαφορετικών προϊόντων αντίδρασης Maillard (MRPs) σε αιμοσφαιρίνη και μυοσφαιρίνη. Αυτό οδήγησε στον σχηματισμό μιας τροποποιημένης πρωτεϊνικής μορφής, γνωστής ως αιμόχρωμα (hemichrome). Επιπλέον, χρησιμοποιήθηκε φασματοσκοπία φθορισμού ως συμπληρωματική τεχνική για τη μελέτη της αντίδρασης της αιμοσφαιρίνης με τα προϊόντα αντίδρασης Maillard (MRPs) από ένα σύστημα μοντέλου ασπαραγίνης-μονοσακχαρίτη. Η τροποποίηση της αιμοσφαιρίνης από τα προϊόντα αντίδρασης Maillard (MRPs) απεδείχθη μέσω συγκεκριμένων αλλαγών στην τρυπτοφάνη στα φάσματα φθορισμού.
URI: http://ktisis.cut.ac.cy/handle/10488/10872
Rights: Απαγορεύεται η δημοσίευση ή αναπαραγωγή, ηλεκτρονική ή άλλη χωρίς τη γραπτή συγκατάθεση του δημιουργού και κάτοχου των πνευματικών δικαιωμάτων.
Type: PhD Thesis
Appears in Collections:Διδακτορικές Διατριβές/ PhD Theses

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
Aristos Ioannou PhD Dissertation_2017 Cover Page and Abstract.pdfAbstract242.54 kBAdobe PDFView/Open
Show full item record

Page view(s)

20
Last Week
2
Last month
checked on Apr 21, 2018

Download(s) 50

5
checked on Apr 21, 2018

Google ScholarTM

Check


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.